“運載體”和“基因表達載體”有什么不同？可有聯(lián)系？
表達載體上的啟動子和終止子是本身具有還是后加上去的呢？
1、不同點：
⑴ “運載體”泛指基因工程操作中能將目的基因送達受體細胞的工具。如細菌質粒等。
相對“基因表達載體”而言，“運載體”主要是強調它能運輸目的基因這一功能，只要能運輸
目的基因就算是運載體，并不計較是不是真正運輸了目的基因。
⑵“基因表達載體”，是實施了運輸目的基因、并且要保證目的基因到達受體細胞后能夠表達的運載體。
這樣看來，運載體、基因表達載體二者之間就不能完全等同。
2、聯(lián)系：
“基因表達載體”是在”運載體”的基礎上構建成的。
基因表達載體的構成：目的基因 + 啟動子 + 終止子 + 標記基因
3、表達載體上的啟動子和終止子是本身具有還是后加上去的呢？
這個問題，教科書中并沒有明確說明，但我個人的觀點是：這要看獲取目的基因的方法，而問題的
根源在于基因的結構。關于基因的結構，在新課程標準中也不再做為教學的要求了。
（人類）結構基因的基本結構：上游非編碼區(qū) + 啟動子 + 編碼區(qū) + 終止子 + 下游非編碼區(qū)
人類結構基因4個區(qū)域：
① 前導區(qū)，位于編碼區(qū)上游，相當于RNA5’末端非編碼區(qū)（非翻譯區(qū)）；
② 編碼區(qū)，包括外顯子與內含子；
③ 尾部區(qū)，位于RNA3’編碼區(qū)下游，相當于末端非編碼區(qū)（非翻譯區(qū)）；
④ 調控區(qū)，包括啟動子和增強子等；蚓幋a區(qū)的兩側也稱為側翼順序（圖1－１）。
⑴．啟動子：啟動子（promoter）能促進轉錄過程。也有人將啟動子稱為“RNA聚合酶識別位點”。
包括下列幾種不同順序：
① TATA框（TATA box）：其一致順序為TATAATAAT。它約在基因轉錄起始點上游約-30-50bp處，基本上由A-T堿基對組成，是決定基因轉錄始的選擇，為RNA聚合酶的結合處之一，RNA聚合酶與TATA框牢固結合之后才能開始轉錄。
② CAAT框（CAAT box）：其一致順序為GGGTCAATCT，是真核生物基因常有的調節(jié)區(qū)，位于轉錄起始點上游約-80-100bp處，可能也是RNA聚合酶的一個結合處，控制著轉錄起始的頻率。
③ GC框（GC box）：有兩個拷貝，位于CAAT框的兩側，由GGCGGG組成，是一個轉錄調節(jié)區(qū)，有激活轉錄的功能。
此外，RNA聚合酶Ⅲ負責轉錄tRNA的DNA和5SrDNA，其啟動子位于轉錄的DNA順序中，稱為下游啟動子。
⑵．終止子：在一個基因的末端往往有一段特定順序，它具有轉錄終止的功能，這段終止信號的順序稱為終止子（termianator）。終止子的共同順序特征是在轉錄終止點之前有一段回文順序，約7-20核苷酸對。回文順序的兩個重復部分由幾個不重復堿基對的不重復節(jié)段隔開，回文順序的對稱軸一般距轉錄終止點16-24bp。
在回文順序的下游有6-8個A-T對，因此，這段終止子轉錄后形成的RNA具有發(fā)夾結構，并具有與A互補的一串U，因為A-U之間氫健結合較弱，因而RNA/DNA雜交部分易于拆開，這樣對轉錄物從DNA模板上釋放出來是有利的，也可使RNA聚合酶從DNA上解離下來，實現轉錄的終止。
由此可見：啟動子、終止子對于基因的表達來說，是非常重要的。
⑶.獲取目的基因的方法：
①.散彈槍法——用限制酶直接從DNA上切取。
顯然，這種方法獲得的目的基因是結構完整的，即含有啟動子和終止子的。在DNA連接酶的催化
下可直接與運載體構成重組DNA——基因表達載體。
②.反轉錄法——以mRNA為模板，以游離脫氧核苷酸為原料，在逆轉錄酶催化下形成DNA。
顯然，這種方法所得到的只是結構基因的編碼區(qū)，并不是完整的基因，也就是說缺乏啟動子和終止子，就需要后加上二者。
③.人工化學合成法——在已知目的基因脫氧核苷酸序列的情況下，在DNA合成儀中人工合成。
顯然，這種方法所獲得的目的基因結構也應該是完整的。