題跟蹤檢測(cè)(十五)
1.(2021·福建廈門(mén)市·廈門(mén)雙十中學(xué)高三其他模擬)Ti質(zhì)粒上的T區(qū)即為T-DNA,雖然是在原核生物中產(chǎn)生的,但是當(dāng)其整合到植物細(xì)胞核基因組后,也能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯。下圖為用Ti質(zhì)粒作為載體進(jìn)行植物基因工程的部分步驟示意圖;卮鹣铝袉(wèn)題:
(1)圖中①②過(guò)程需要用到的工具酶是__限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)、DNA連接酶__。③過(guò)程常用的方法是__Ca2+處理法(或感受態(tài)細(xì)胞法或Ca2+溶液處理法)__。
(2)pBR322質(zhì)粒載體是研究最多、使用最早且應(yīng)用最廣泛的大腸桿菌質(zhì)粒載體之一,作為高質(zhì)量的載體,應(yīng)具備的條件有__具有復(fù)制起點(diǎn)(或具有自我復(fù)制能力或能夠自我復(fù)制);具有標(biāo)記基因;具有一個(gè)或多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn);對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害;分子大小合適便于操作__(答2條)。
(3)圖中的“植物基因”是目的基因,常用的擴(kuò)增技術(shù)是__PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))__,其原理是__DNA雙鏈復(fù)制__。將該基因插入到T-DNA的非必需區(qū)域而不是其它區(qū)域的原因是__防止破壞T-DNA的轉(zhuǎn)移(轉(zhuǎn)移整合)特性和表達(dá)能力(轉(zhuǎn)移、整合、表達(dá)(轉(zhuǎn)錄和翻譯)__。