DNA的粗提取與鑒定
知識•巧學(xué)
一、提取DNA的方法
1.基本思路
利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。
2.DNA的理化性質(zhì)
(1)DNA的溶解性,DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,此外,DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用上述特點(diǎn)可達(dá)到分離DNA的目的。
(2)DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性,蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60~80 ℃的高溫,而DNA在80 ℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響。
要點(diǎn)提示 DNA的溶解度與NaCl溶液濃度的關(guān)系:當(dāng)NaCl溶液濃度低于0.14 mol/L時(shí),隨濃度的升高,DNA的溶解度降低;當(dāng)NaCl溶液濃度高于0.14 mol/L時(shí),隨濃度升高,DNA的溶解度升高。
3.DNA的鑒定
DNA遇二苯胺(沸水。⿻(huì)染成藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定D.A的試劑。
知識拓展 蛋白質(zhì)的溶解度與鹽溶液濃度的關(guān)系:在中性鹽溶液中,低濃度時(shí),蛋白質(zhì)的