[典題](2021山東淄博一模)與棉花發(fā)育相關(guān)的GhMADS12基因能調(diào)節(jié)棉花根、莖、葉、花的發(fā)育和果實(shí)的成熟。科學(xué)家將克隆得到的GhMADS12基因與載體結(jié)合構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程如下圖所示。請回答下列問題。
(1)若用PCR技術(shù)擴(kuò)增GhMADS12基因,需要在PCR儀中加入 種引物,引物的作用是 。除了引物、DNA模板之外,PCR反應(yīng)體系中還需提供 (至少答出兩點(diǎn))。
(2)GhMADS12基因和pBI121質(zhì)粒的T-DNA經(jīng)限制酶SmaⅠ和XbaⅠ切割斷開的化學(xué)鍵是 。原核生物中的限制酶不切割自身DNA的原因是 。
(3)圖中的CaMV35S為啟動(dòng)子,GUS為標(biāo)記基因,NOS為終止子,據(jù)圖分析,目的基因GhMADS12插入的具體位點(diǎn)是 。
A.啟動(dòng)子的上游
B.啟動(dòng)子的下游,終止子的上游
C.終止子的下游