一、測(cè)定微生物數(shù)量的方法
測(cè)定微生物數(shù)量的方法可分為兩類(lèi):直接計(jì)數(shù)法和間接計(jì)數(shù)法。前者常用的是顯微鏡直接計(jì)數(shù)法,這種方法是先將待測(cè)樣品制成懸液,然后取一定量的懸液放在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)。該方法適用于純培養(yǎng)懸浮液中各種單細(xì)胞菌體的計(jì)數(shù)。后者最常用的是稀釋平板計(jì)數(shù)法,需要將待測(cè)樣品配制成均勻的系列稀釋液并使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi),經(jīng)培養(yǎng)后統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中出現(xiàn)的菌落數(shù),從而推算出樣品中的活菌數(shù)。
利用血球計(jì)數(shù)板測(cè)出的菌體數(shù)與平板計(jì)數(shù)法相比哪個(gè)多些?
【提示】 血球計(jì)數(shù)板測(cè)出的是全部菌體數(shù),而平板計(jì)數(shù)法只能測(cè)出活菌數(shù),而且比實(shí)際數(shù)偏少。
二、間接計(jì)數(shù)法的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
1.制備土壤稀釋液
取土壤表層5~10 cm處的土樣。準(zhǔn)確稱(chēng)取1 g土樣,放入盛有99 mL無(wú)菌水的錐形瓶中,振蕩20 min后制成102倍的稀釋液。然后進(jìn)行系列稀釋?zhuān)玫?span lang="EN-US">103、104、105、106倍的系列稀釋菌液。
2.取樣及倒平板
3.培養(yǎng)
4.觀察記錄
(1)計(jì)數(shù)時(shí)對(duì)于細(xì)菌、放線菌以每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)有30~300個(gè)菌落為宜,霉菌以每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)有10~100個(gè)菌落為宜。
(2)計(jì)算每克樣品菌數(shù)公式為:每克土壤樣品菌數(shù)=×稀釋倍數(shù)。