1.動物細胞培養(yǎng)
(1)概念:取動物機體的相關(guān)組織分散成單個細胞后,在適宜培養(yǎng)基中使細胞生長和增殖的過程。
(2)基本過程:培養(yǎng)的動物細胞大都取自動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官組織,將組織取出來以后,先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進行處理,使細胞分散成單個細胞,然后配制一定濃度的懸浮液,在培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)。隨著細胞的生長和增殖,大多數(shù)細胞不適應(yīng)懸浮生長,它們必須在固定的表面上生長和分裂,細胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長,隨著細胞越來越多,貼壁生長的細胞分裂生長到表面相互接觸時就停止分裂增殖,這種現(xiàn)象叫接觸抑制。這樣就需定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離下來,配成細胞懸浮液,分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中進行傳代培養(yǎng)。在傳代培養(yǎng)中出現(xiàn)細胞株和細胞系兩種類型。如下所示:
動物機體組織胰蛋白酶[]膠原蛋白酶單個細胞洗滌、稀釋[]分裝原代細胞→傳代細胞(細胞株)→傳代細胞(細胞系)
(3)條件:環(huán)境無毒、無菌,溫度、pH適宜,營養(yǎng)全面,有CO2和O2氣體。
(4)應(yīng)用:①生產(chǎn)生物制品;②與基因工程相結(jié)合;③有毒物質(zhì)的檢測。
(5)動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較如下表所示: